大腸桿菌顯色培養(yǎng)基原理

　　

　　M1295I配方根據(jù)ISO166492:1999設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)

　　

　　X-葡萄糖醛酸檢測(cè)?-葡萄糖醛酸酶

　　

　　大腸桿菌——藍(lán)綠色

　　

　　其他-無(wú)色

　　

　　大腸桿菌顯色培養(yǎng)基操作步驟

　　

　　1、按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液；

　　

　　2、取樣品液1ml加入冷卻至45-50℃顯色培養(yǎng)基中混勻或涂布于平板上；

　　

　　3、36℃培養(yǎng)18～24h，選用有30～200個(gè)菌落的平板，計(jì)數(shù)平板上出現(xiàn)的典型大腸桿菌菌落。大腸桿菌典型菌落為藍(lán)綠色，其它細(xì)菌為無(wú)色或黃色菌落。

　　

　　總大腸桿菌=藍(lán)綠色菌落；

　　

　　4、對(duì)可疑大腸桿菌菌落可劃線(xiàn)接種到營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上，36℃培養(yǎng)12-16小時(shí)，挑取單菌落做大腸桿菌全套生化試驗(yàn)(本公司有生化鑒定管套裝4種x4套)。

　　

　　大腸桿菌顯色培養(yǎng)基使用方法：

　　

　　1.稱(chēng)取本品干粉41.6g，用1000mL蒸餾水或純水溶解，可按比例擴(kuò)增或縮小。

　　

　　2.混合均勻加熱至100℃，并不斷攪拌直至*溶解，無(wú)需滅菌。

　　

　　3.采用傾注法：將培養(yǎng)基水浴冷卻至約50℃，準(zhǔn)備直徑90mm已滅菌平皿，每個(gè)培養(yǎng)皿接種1ml樣品，然后傾注約15ml上述溶解的培養(yǎng)基，混勻使其凝固，倒置，37℃培養(yǎng)24小時(shí)。

　　

　　4.采用表面接種法：冷卻至約50℃，搖勻?qū)⑴囵B(yǎng)基傾注于已滅菌平皿中。在室溫可保存一天或在冰箱里貯存數(shù)天(避光，4℃)。樣品用劃線(xiàn)接種法或?yàn)V膜法，37℃培養(yǎng)24小時(shí)。

　　

　　大腸桿菌顯色培養(yǎng)基注意事項(xiàng)：

　　

　　1.稱(chēng)量時(shí)注意粉塵，佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統(tǒng)不適。

　　

　　2.干粉培養(yǎng)基使用后立即旋緊瓶蓋，避免吸潮結(jié)塊。

　　

　　3.自制平板時(shí)需注意培養(yǎng)基的厚度，厚度過(guò)薄容易造成瓊脂水分保持性下降，開(kāi)裂；因此，一般需要15-20mL（Φ90mm）體積培養(yǎng)基，平板培養(yǎng)基厚度至少為2mm。