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細胞培養的基本原理與技術

更新時間:2021-11-17  |  點擊率:868

現代生物技術一般認為包括基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發酵工程技術,而這些技術的發展幾乎都與細胞培養有密切關系,特別是在醫藥領域的發展,細胞培養更具有特殊的作用和價值。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產過程中很多是通過細胞培養來實現的。基因工程乙肝疫苗很多是以CHO細胞作為載體;細胞工程中更是離不細胞培養,雜交瘤單克隆抗體,*是通過細胞培養來實現的,既使是現在飛速發展的基因工程抗體也離不開細胞培養。正在倍受重視的基因治療、體細胞治療也要經過細胞培養過程才能實現,發酵工程和酶工程有的也與細胞培養密切相關。總之,細胞培養在整個生物技術產業的發展中起到了很關鍵的核心作用。

第一節 體外培養的概念

一、基本概念 體外培養(in vitro culture),就是將活體結構成分或活的個體從體內或其寄生體內取出,放在類似于體內生存環境的體外環境中,讓其生長和發育的方法。

組織培養:是指從生物體內取出活的組織(多指組織塊)在體外進行培養的方法。

細胞培養:是指將活細胞(尤其是分散的細胞)在體外進行培養的方法。

器官培養:是指從生物體內取出的器官(一般是胚胎器官)、器官的一部分或器官原基在體外進行培養的方法。

二、體內、外細胞的差異和分化

1、差異:細胞離體后,失去了神經體液的調節和細胞間的相互影響,生活在缺乏動態平衡相對穩定環境中,日久天長,易發生如下變化:分化現象減弱;形態功能趨于單一化或生存一定時間后衰退死亡;或發生轉化獲得不死性,變成可無限生長的連續細胞系或惡性細胞系。因此,培養中的細胞可視為一種在特定的條件下的細胞群體,它們既保持著與體內細胞相同的基本結構和功能,也有一些不同于體內細胞的性狀。實際上從細胞一旦被置于體外培養后,這種差異就開始發生了。

2、分化:體外培養的細胞分化能力并未*喪失,只是環境的改變,細胞分化的表現和在體內不同。細胞是否表現分化,關鍵在于是否存在使細胞分化的條件,如Friend細胞(小鼠紅白血病細胞)在一定的因素作用下可以合成血紅蛋白,血管內皮細胞在類似基膜物質底物上培養時能長成血管狀結構,雜交瘤細胞能產生特異的單克隆抗體,這些均屬于細胞分化行為。

科研實驗中,細胞的體外培養一直是一個重要環節。細胞要養好,就要用好血清,如Ausbian®特級胎牛血清,它適合各種細胞培養,尤其適合難養細胞,如:干細胞、肝細胞,神經細胞,原代培養、細胞融合、轉染細胞等。

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