細(xì)胞培養(yǎng)被支原體污染是個(gè)世界性問(wèn)題，在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%。支原體是一類無(wú)細(xì)胞壁，形態(tài)呈高度多形性，為圓形、絲狀或梨形，其直徑僅有0.13～0.18μm，變形能力大，故能通過(guò)濾菌器，突出的結(jié)構(gòu)特征是沒(méi)有細(xì)胞壁，對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素不敏感。研究表明，支原體能耗盡營(yíng)養(yǎng)物，促進(jìn)代謝積累，導(dǎo)致pH改變，對(duì)細(xì)胞造成多種影響，包括生長(zhǎng)狀況、生化特性、代謝、免疫、以及細(xì)胞存活等多方面的改變，繼而干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，或造成無(wú)法解釋的差異。更加不幸的是拯救被感染的細(xì)胞幾乎是不可能的。

目前已知的主要污染源是動(dòng)物血清、胰酶和已污染培養(yǎng)物的氣溶膠，例如，豬鼻支原體通過(guò)胰酶，在消化細(xì)胞時(shí)進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)物，并造成污染。在原代細(xì)胞與傳代細(xì)胞的檢測(cè)中，原代細(xì)胞與傳代細(xì)胞分離出支原體的頻率是有明顯差異的，傳代次數(shù)越多的細(xì)胞，污染支原體的可能性就越大，這也是多次與動(dòng)物血清、胰酶和已污染培養(yǎng)物的氣溶膠接觸后造成的，在原代細(xì)胞中，污染率低于4%，而傳代細(xì)胞的污染率則高達(dá)57%~92%。

如何預(yù)防支原體的污染

通常來(lái)說(shuō)，被污染的細(xì)胞應(yīng)該丟棄，以避免成為污染源。但對(duì)于珍貴的細(xì)胞，以往別的品牌的支原體清除劑，其實(shí)只是抑制劑，它們抑制支原體的DNA合成和蛋白合成，但無(wú)法殺除。Mynox®是市面上一款具有殺滅作用的清除劑。它提取自枯草桿菌，可與支原體膜特異性結(jié)合，破壞膜通透性，導(dǎo)致支原體膨脹破裂而死。