PCR怎樣才能『準(zhǔn)確靈敏且穩(wěn)定』？這些關(guān)鍵點(diǎn)需注意！

更新時(shí)間：2023-05-23 | 點(diǎn)擊率：1351

PCR（其中包含qPCR）是一種常用的分子生物學(xué)技術(shù)，作為一類基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)，具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

除了常見(jiàn)的基因表達(dá)分析這類理論研究中，需要用到PCR技術(shù)，在臨床檢測(cè)、藥物生產(chǎn)過(guò)程監(jiān)控等流程中，也會(huì)用到PCR技術(shù)。其中，用于細(xì)胞治療、疫苗生產(chǎn)等過(guò)程支原體檢測(cè)的，德國(guó)Minerva Biolabs支原體檢測(cè)試劑盒，也是基于qPCR的原理。

PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、靈敏性和穩(wěn)定性，很大程度上會(huì)影響后續(xù)其他實(shí)驗(yàn)。在生物藥項(xiàng)目申報(bào)等過(guò)程中，如果支原體檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)偏差，將有可能導(dǎo)致項(xiàng)目申報(bào)的失敗。因此，保證PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、靈敏性和穩(wěn)定性十分重要。

Point 1 清潔實(shí)驗(yàn)環(huán)境

PCR實(shí)驗(yàn)造成DNA大量合成，常常會(huì)給實(shí)驗(yàn)室?guī)?lái)核酸污染。由于核酸產(chǎn)物不能自動(dòng)降解，因此DNA污染會(huì)不斷積聚。

由于PCR本身的特點(diǎn)，少量污染的DNA或RNA分子也會(huì)被檢測(cè)出來(lái)，從而造成實(shí)驗(yàn)偏差。

傳統(tǒng)的紫外照射，僅對(duì)500bp以上長(zhǎng)片段有效，對(duì)短片段效果不大，因此，該方法對(duì)祛除DNA污染并不理想。那么問(wèn)題來(lái)了，該如何有效清除核酸污染？

使用德國(guó)Minerva Biolabs公司（簡(jiǎn)稱MB）的PCR污染祛除劑PCR Clean™。

PCR Clean™有噴霧和濕巾兩種樣式，在1分鐘之內(nèi)即可有效地祛除核酸污染（對(duì)質(zhì)粒、基因組和DNA、RNA擴(kuò)增片段均有效），適合各種實(shí)驗(yàn)臺(tái)、操作區(qū)域、設(shè)備和實(shí)驗(yàn)耗材，高效迅速，使用方便。

Point 3 合適的樣品制備

合適的樣品制備，包括DNA提取和純化，可以幫助防止可能干擾PCR擴(kuò)增的污染物或抑制劑的引入。

在檢測(cè)細(xì)胞中是否含有支原體時(shí)，除支原體檢測(cè)試劑盒Venor®Gem qEP以及標(biāo)準(zhǔn)品外，建議配套使用德國(guó)MB支原體DNA提取試劑盒，保證實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性。