細(xì)胞治療項(xiàng)目離不開支原體檢測。qPCR支原體檢測法（NAT法），相較于藥典中傳統(tǒng)的培養(yǎng)法和指示細(xì)胞法，NAT法方便快捷、準(zhǔn)確性高、特異性強(qiáng)。 

使用嵌合抗原受體(CAR) T細(xì)胞的過繼細(xì)胞療法(ACT)已經(jīng)改變了復(fù)發(fā)/難治性CD19+ B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病和淋巴瘤的治療。在實(shí)體瘤的情況下，盡管在解決腫瘤浸潤有限、CAR - T功能差和持久性等問題方面取得了進(jìn)展，但迄今為止，CAR - T治療還不太成功。

然而，CAR - T細(xì)胞治療腫瘤的兩個(gè)關(guān)鍵挑戰(zhàn)是預(yù)先存在的抗原異質(zhì)性，即并非所有腫瘤細(xì)胞都表達(dá)CAR靶向的抗原，以及治療過程中發(fā)生的抗原丟失。例如，最近的一項(xiàng)人體臨床試驗(yàn)評(píng)估了靶向突變EGFRvIII的CAR - T細(xì)胞在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(GBM)中的作用，結(jié)果出現(xiàn)了EGFRvIII腫瘤即使在最初對(duì)CD19 CAR - T治療有反應(yīng)的白血病患者中，也經(jīng)常觀察到CD19抗原的缺失或下調(diào)，并經(jīng)常導(dǎo)致疾病復(fù)發(fā)抗原丟失的另一種機(jī)制是通過炎癥誘導(dǎo)的黑素瘤去分化這些觀察結(jié)果強(qiáng)調(diào)需要新的方法來解決抗原損失介導(dǎo)的腫瘤逃逸。

抗原擴(kuò)散(AS)是對(duì)不同于原始治療靶點(diǎn)的次級(jí)抗原的免疫反應(yīng)的誘導(dǎo)和擴(kuò)增在ACT的背景下，利用CAR - T細(xì)胞靶向一種表面表達(dá)抗原，同時(shí)誘導(dǎo)內(nèi)源性T細(xì)胞對(duì)其他腫瘤抗原的反應(yīng)，將是克服腫瘤異質(zhì)性和抗原損失介導(dǎo)逃逸的一種有吸引力的方法。越來越多的證據(jù)表明，在癌癥免疫治療期間，AS可以引起并可能有助于整體治療結(jié)果。例如，在接受ipilimumab治療的患者中發(fā)現(xiàn)了治療前無法檢測到的腫瘤特異性T細(xì)胞的募集和擴(kuò)增。

一些接受新抗原疫苗治療的癌癥患者也對(duì)共同的新抗原或癌睪丸抗原表現(xiàn)出AS。此外，在臨床前和臨床CAR - T細(xì)胞治療的少數(shù)病例中，抗腫瘤抗體反應(yīng)增加或T細(xì)胞反應(yīng)減弱。盡管如此，迄今為止，CAR - T細(xì)胞療法本身誘導(dǎo)具有治療意義的AS的證據(jù)有限。臨床前，大多數(shù)CAR - T研究使用免疫缺陷小鼠，根據(jù)定義排除內(nèi)源性T細(xì)胞反應(yīng)。在免疫能力強(qiáng)的小鼠模型中，CAR - T療法本身觸發(fā)AS的能力似乎有限，尤其是在實(shí)體瘤中相比之下，CAR - T細(xì)胞工程與額外的免疫反應(yīng)引發(fā)分子，包括FLT3L、CD40L、 IL-12、IL-18、和IL-7/CCL或當(dāng)與溶瘤病毒聯(lián)合使用已被報(bào)道顯示出增強(qiáng)的抗腫瘤活性和證據(jù)。

然而，將這些額外的效應(yīng)功能引入到具有統(tǒng)一活性的CAR - T細(xì)胞中可能具有挑戰(zhàn)性，并導(dǎo)致新的安全風(fēng)險(xiǎn)。更重要的是，無論CAR - T細(xì)胞的形態(tài)如何，在ACT過程中AS被促進(jìn)的機(jī)制仍然知之甚少。

近日，研究人員在《Cell》上發(fā)表了一篇標(biāo)題為：“Vaccine-boosted CAR T crosstalk with host immunity to reject tumors with antigen heterogeneity"的文章，描述了一種增強(qiáng)實(shí)體腫瘤中CAR - T活性的方法，即通過淋巴結(jié)中的CAR - T細(xì)胞的疫苗樣增強(qiáng)CAR - T細(xì)胞這是通過合成與兩親性聚合物脂質(zhì)尾部結(jié)合的CAR配體來完成的，在腸外注射后，CAR - T配體有效地運(yùn)輸?shù)揭髁馨徒Y(jié)(dln)，并用CAR - T配體修飾巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞(DCs)的表面。CAR - T細(xì)胞在淋巴結(jié)中遇到配體修飾的樹突狀細(xì)胞，通過CAR與天然共刺激受體信號(hào)和來自配體呈遞細(xì)胞的細(xì)胞因子刺激一起接受刺激，導(dǎo)致CAR - T細(xì)胞擴(kuò)增和功能增強(qiáng)。通過給藥這些“amph-配體"和疫苗佐劑來增強(qiáng)CAR - T細(xì)胞的疫苗，大大增強(qiáng)了CAR - T細(xì)胞治療對(duì)腫瘤的排斥反應(yīng)，并且出乎意料地伴隨著內(nèi)源性抗腫瘤T細(xì)胞反應(yīng)的發(fā)展。

研究人員使用CAR - T療法與疫苗增強(qiáng)相結(jié)合的方法作為模型設(shè)置，以了解as在清除抗原性異質(zhì)實(shí)體瘤中的作用，并確定as的潛在機(jī)制。在多個(gè)小鼠同基因腫瘤模型中，我們發(fā)現(xiàn)使用第二代CAR - T細(xì)胞治療引起的AS可以忽略不計(jì)。然而，即使在淋巴細(xì)胞耗竭(LD)預(yù)處理的情況下，疫苗增強(qiáng)CAR - T細(xì)胞也能顯著誘導(dǎo)內(nèi)源性T細(xì)胞啟動(dòng)。這一過程嚴(yán)重依賴于IFN-γ，通過疫苗增強(qiáng)或基因工程誘導(dǎo)的IFN-γ表達(dá)增強(qiáng)使CAR - T細(xì)胞能夠控制具有預(yù)先存在的抗原異質(zhì)性的實(shí)體腫瘤。